固定样本SEM（脱水干燥喷金拍照）

　　扫描电镜(SEM)利用电子和物质的相互作用，可以获取被测样品本身的各种物理、化学性质的信息，如形貌、组成、晶体结构、电子结构和内部电场或磁场等等。扫描电子显微镜对二次电子、背散射电子的采集，可直接利用样品表面材料的物质性能进行微观成像，可得到有关物质微观形貌的信息。扫描电镜有较高的放大倍数，20-20万倍之间连续可调;有很大的景深，视野大，成像富有立体感，可直接观察各种试样凹凸不平表面的细微结构;试样制备简单，不含水的样本可以不用固定。

　　万物生物扫描电镜平台主要设备：临界点干燥仪Quorum K850，离子溅射仪HITACHI MC1000，扫描电镜HITACHI Regulus 8100。

　　扫描电镜HITACHI Regulus 8100主要技术指标：

　　二次电子分辨率：1.0nm(加速电压15kV、WD=4mm) 1.3nm(加速电压1kV、WD=1.5mm)

　　放大倍数：1000～1000,000

　　加速电压：0.1-30KV

　　扫描电镜广泛用于植物学、动物学、细胞生物学、微生物学、医学、材料科学、冶金等诸多学科中物体组织表面或断面的精细结构研究。常见可观察细胞表面、植物木质部、叶面、动物毛纤维、病毒颗粒、外泌体、治病虫害、生物医学材料、晶体材料、细菌、真菌等。

实验流程：

　　脱水-干燥-喷金-拍照

结果展示

　　1、细胞

　　2、叶片腺毛

送样运输要求

　　送样时请下载详细填写附件中送样单并与样品一起送达赛维尔生物超微病理实验室。

　　扫描电镜样本准备方法及要求

1、动植物组织样本

　　①1-3min内取样，组织块不超过3mm2，用PBS轻轻漂洗将样本表面的血污，毛发等去掉，将需要扫描的面做好标记(如在对面进行剪角处理)。

　　②取材时一定注意避免镊子挤压等机械损伤，刀片要锋利避免挫伤组织。尤其是注意保护扫描面。

　　③组织取下后立即投入电镜固定液内室温固定2h，再转移至4°保存，4°冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

　　④植物样本放入固定液后需抽气沉底。

2、细胞样本

　　贴壁细胞：细胞必须贴壁于盖玻片上制成爬片，细胞弃培养基，用PBS轻轻漂洗后，弃PBS加电镜固定液室温固定2h，再转移至4°保存，4°冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

　　悬浮细胞：离心收集细胞要肉眼可见细胞沉淀米粒大小，弃培养基后用PBS轻轻漂洗后，弃PBS加电镜固定液，细胞必须吹散悬浮于固定液内，室温固定2h，再转移至4°保存，4°冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

3、细菌样本

　　固体培养基的细菌：细菌必须贴壁于盖玻片上制成爬片，用盖玻片轻轻覆盖在菌落上，在培养箱培养一晚上，第二天轻轻揭下来，放入固定液中室温固定2h，再转移至4°保存， 4°冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

　　悬浮细菌孢子等：离心收集细菌要肉眼可见细菌沉淀芝麻至绿豆大小，弃培养基后用PBS轻轻漂洗后，弃PBS加电镜固定液，必须吹散悬浮于固定液内，室温固定2h，再转移至4°保存，4°冰袋运输，在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

4、其他如粉末状材料

　　直接准备干燥的粉剂。带有磁性的金属材料不能做扫描电镜。