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组化/荧光分析【价格:每一□代表一项,组化/荧光普通切片30元/项/指标/切片(扫描是分析整张切片或一个特定区域,拍照是分析每张切片中3张照片);芯片组化扫描结果分析260元/项/芯片(对每个点独立分析,总点数小于200个点);芯片荧光扫描结果分析650元/项/指标/芯片(对每个点独立分析,总点数小于200个点);芯片分析中如果要对每个点中特定区域单独分析,需提前说明,根据实际难易程度收取相关费用】
□面密度,累积光密度值(IOD)/待测区域组织面积:
累积光密度值是所有阳性信号光密度的积分,除以待测区域组织面积可反映阳性多少和深浅,成正比。优点是既考虑了阳性的面积以及阳性的深浅,且不受待测组织大小的影响。
□阳性率,阳性细胞数/总细胞数:
分析阳性细胞数占总细胞数的占比。反映阳性细胞数量比率高低,成正比。优点适用于细胞类型较单一的情况。比如肿瘤组织中KI67指标肿瘤细胞增值比率,脾脏组织内CD3指标T细胞比率等。
□阳性细胞密度,阳性细胞数/待测区域组织面积:
分析阳性细胞数占待测区域组织面积之比。反映单位面积内阳性细胞个数,成正比。优点不受多种细胞类型数量影响。常用在浸润型的炎性细胞中,比如肝组织中某类炎性细胞占比,代表性指标MPO、CD68等。
□阳性强度,各阳性点颜色深浅的平均值:
反应整张片子或者某个区域阳性的平均深浅度。明场为平均光密度(average optical density),暗场为平均强度(average intensity),数值越大阳性程度越强。适用性广,由于没有考虑阳性面积,在极端情况下会出现,阳性极少且颜色深时阳性强度值高,阳性点多且颜色浅时阳性强度值低。可以结合阳性面积一起评价。
□阳性面积比,阳性面积/待测区域组织面积:
不考虑阳性深浅的变化,单纯的比较阳性面积占比。
□MVD,微血管数量/视野:
单位面积内微血管数量,对于微血管的识别不需具备完整的管腔和红细胞,只要有明显的血管内皮细胞染色、并且能与相邻的血管、实质细胞以及间质成分相分隔的,就可视为一个独立的血管,分辨不清、管腔直径>8个红细胞直径的血管以及具有较厚肌层的血管不纳入计数内。常用指标CD31、CD34。此项只能分析高倍视野的图片。
□免疫组化评分,IRS评分:
对免疫组化切片中的染色程度(0-3分)以及阳性率(0-4分)分别评分后相乘得到综合评分(0-12分)。具体如下,染色强度以目的细胞呈现染色特性计分:无着色为0分,淡黄色为1分,棕黄色为2分,棕褐色为3分;以细胞阳性比率进行计分:0~5%为0分,6%~25%为1分,26%~50%为2分,51%~75%为3分,>75%为4分。综合评分可划分阳性高低后进行统计,常用于癌和癌旁的芯片生存分析中。
□H-Score:
即 Histochemistry score (组织化学评分)的缩写,是处理免疫组化的一种组织学评分方法,将每张切片内阳性数量及其染色强度转化为相应的数值,达到对组织染色半定量的目的。H-Score(H-SCORE=∑(pi×i)=(percentage of weak intensity×1)+(percentage of moderate intensity×2)+(percentage of strong intensity×3),式中pi表示阳性信号像素面积/细胞数量占比;i代表着色强度)。H-score为0-300之间的数据,数据越大说明综合阳性强度越强。
□免疫荧光多标阳性共定位分析:
测量整张扫描切片或者指定区域中单独通道的数据以及指定共定位的数据(阳性面积或阳性率值表示,选其一)。
免疫荧光空间距离分析:
主要用来研究肿瘤微环境,炎性细胞和肿瘤细胞之间的距离关系等。
□分析一种指标标记的细胞周围多少微米范围之内另一指标标记的细胞数量,可以设置不同范围;
□分析不同指标标记细胞之间的平均距离;
□以某处为界(如肿瘤灶、坏死灶或指定区域等)分析该区域多少微米范围之内不同指标标记的细胞数量,例如肿瘤周围500um内CD3阳性细胞的数量。
目前使用的软件:
名称 |
厂家 |
型号 |
扫描浏览软件 |
3DHISTECH(Hungary) |
CaseViewer2.4 |
图片分析软件 |
Media Cybemetics(U.S.A) |
Image-Pro Plus 6.0 |
图片分析软件 |
National Institutes of Health(U.S.A) |
ImageJ 1.51K |
扫描分析软件 |
3DHISTECH(Hungary) |
Quant Center2.1 |
扫描分析软件 |
Indica labs(U.S.A) |
Halo v3.0.311.314 |
统计软件 |
IBM(U.S.A) |
SPSS v20 |
绘图软件 |
GraphPad Software(U.S.A) |
GraphPad Prism 5 |
分析软件 |
万物(CHN) |
AIpathwell v2 |
货号 |
名称 |
规格 |
价格(元) |
BY-8019 |
组化/荧光分析 |
张/指标/项 |
30 |
实验结果展示:
实验流程:
(1)样片接收:图片或扫描文件。
(2)实验步骤:按要求选定测量区域后按测量要求进行测量数据。
(3)实验结果:测量报告,报告内有测量方法、应用软件说明、示意图以及原始数据。
注意事项:
1、拍照倍数可选,一般按照分析目的选择倍数,常见200×等。
2、IHC/IF不同的指标侧重点不同,选择的项目不同,根据不同指标的意义或者参考文献选择合适的项目。
3、如果是直接给的图片,应保持大小、背景光等参数一致。
送样运输要求:
无。