Edu染色

　　EdU(5-Ethynyl-2’- deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)渗入正在复制的DNA分子中，通过基于EdU与Apollo®荧光染料的特异性反应快速检测细胞DNA复制活性，适用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA修复、病毒复制、细胞标记示踪等方面。

实验结果展示：

EDU

实验流程：

　　1.每孔加入2 mg/mL甘氨酸，脱色摇床孵育5分钟后，弃甘氨酸溶液;

　　注：作用是中和多聚甲醛，当采用其他方式进行细胞固定时可省略此步骤;

　　2.每孔加入100 μL PBS，脱色摇床清洗5分钟，弃PBS;

　　3.每孔加入100μL渗透剂(0.5% TritonX-100的PBS)脱色摇床孵育10分钟;PBS清洗1次，5分钟。

　　注：当实验需要进行其他抗体染色，或由于某些细胞类型对染料的吸附性较高，可能需要增强细胞膜通透性。

　　4.每孔加入100 μL的1X Apollo®染色反应液，避光、室温、脱色摇床孵育30分钟后，弃染色反应液;

　　5.加入100 μL渗透剂(0.5% TritonX-100的PBS)脱色摇床清洗2~3次，每次10分钟，弃渗透剂;

　　6.(加强)每孔每次加入100 μL甲醇清洗1~2次，每次5分钟;PBS清洗1次，每次5分钟。

　　注：由于某些细胞对染料的吸附性较高，需采用加强方式洗脱以降低染料背景。

　　染DAPI，封片，镜检。

送样运输要求：

　　1.组织样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上，常温运输送样。

　　2.石蜡切片常温保存运输

　　3.冰冻切片-20℃保存运输

　　4.细胞爬片固定液浸泡，4℃保存运输